توسط : محلول اتیلن دی آمین تتراستیک اسید ( EDTA ) 0.5 مولار با pH 8.0 محلولی است که معمولاً به عنوان لیگاند و عامل کیلیت استفاده می شود. EDTA به ویژه در جداسازی یون های فلزی مانند Ca2+ و Mg2+ مفید است. از آنجایی که نوکلئازها به یون های فلزی نیاز دارند، از محلول های EDTA برای محافظت از DNA و RNA در برابر تخریب استفاده می شود.
دستورالعمل تهیه
دستور العمل زیر برای تهیه محلول 100 میلی لیتری 0.5M EDTA pH 8.0 استفاده می شود.
| معرف | جرم/حجم | غلظت نهایی |
|---|---|---|
| نمک دی سدیم EDTA، دی هیدرات | 18.61 گرم | 0.5 مولار |
| آب مقطر | 80 میلی لیتر |
با یک محاسبه ساده می توان مقادیر کمتری از این محلول را نیز بدست آورد
نحوه ساخت 0.5M EDTA pH 8.0
- مقدار 18.61 گرم نمک دی سدیم EDTA را وزن کرده، دی هیدراته کنید و به یک ظرف 100 میلی لیتری اضافه کنید.
- مقدار 80 میلی لیتر آب مقطر را اندازه بگیرید و به ظرف اضافه کنید.
- یک تکه مغناطیسی را اضافه کنید و روی یک صفحه همزن مغناطیسی قرار دهید تا محلول مخلوط شود
- از یک pH متر برای اندازه گیری اسیدیته استفاده کنید
- پس از حل شدن کامل (مدتی طول می کشد، پس صبور باشید)، در صورت لزوم محلول را با آب مقطر تارسیدن به حجم 100 میلی لیتر اضافه کنید.
- برای استریل کردن، محلول را در چرخه مایع (20 دقیقه با 15 psi) اتوکلاو کنید.
نگهداری از EDTA
محلول 0.5M EDTA pH 8.0 را در دمای اتاق (15+ تا 25+ درجه سانتیگراد) نگهداری کنید.
توجه : محلول نهایی 0.5M EDTA pH 8.0 به عنوان ماده خطرناک طبقه بندی نمی شود. با این حال، همیشه قبل از استفاده، برگه اطلاعات ایمنی را مطالعه کنید.
جهت مطالعه مقاله ی طرز تهیه بافر TBE بروی این لینک کلیک نمایید
با سلام. مقدار 18.61 رو چه جوری بایستی محاسبه کرد!؟
سلام روز بخیر
EDTA پودر سفید رنگی هست و می تونید این مقدار رو روی ترازوی دیجیتال ازمایشگاهی اندازه گیری کنید
سلام. وقت بخیر
ممنون از پاسخگویی شما
منظور بنده اینه که این مقدار رو با چه فرمول و محاسباتی به دست آوردین!؟!؟
سلام با استفاده جرم مولی EDTA
و البته نتایج این دستور العمل در رفرنس های متعددی قید شده و به صورت مستند وجود داره
در هر صورت EDTA با فرمول C10H16N2O8 هست که برای محاسبه نیم مولار باید از این فرمول استفاده کرد